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MEAT RESEARCH
肉类研究
2010.4
虫茶醇提取物对超氧阴离子和
羟基自由基的清除作用
敖 纯
（西南大学 食品科学学院，重庆 400716）
摘 要：目的：本文对老鹰茶虫茶醇提取物对超氧阴离子和羟基自由基的清除作用进行了研究。方法：以老鹰茶虫茶为原料，以不同浓度的乙醇溶液粗提物，其醇制浸膏采用邻苯三酚法测定O2—、邻二氮菲法测OH体系。结果：老鹰茶虫茶40%乙醇提取物得率为最高。超氧阴离子的清除趋势、活性不一。清除OH的能力依次为：无水乙醇提取物＞20%乙醇提取物＞80%乙醇提取物＞60%乙醇提取物＞40%乙醇提取物。结论：无论是何种浓度乙醇提取物都表现出了良好的清除超氧阴离子和羟基自由基的能力。各种浓度相比之下，20%乙醇提取物对超氧阴离子清除能力较好，无水乙醇提取物对羟基自由基的清除能力较好。
关键词：老鹰茶虫茶；超氧阴离子；羟基自由基；清除作用
Scavenging Effects of Sandy-tea Ethanol Extract on Super
Oxide Anion and Hydroxyl Radical
AO Chun
(College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, China)
Abstract: Objective: This paper studies on the scavenging effects of Hawk-tea-Sandy-tea ethanol extract on Super oxide Anion and Hydroxyl Radical. Methods: For the materials with Hawk-tea-Sandy-tea, then using pyrogallol method to measure super oxide anion radical (O2•－), orthophenanthroline reaction method to measure hydroxyl radical(·OH)by the different solvent concentration extracts. Results: The rate of 40%Ethanol extract is the highest. The clear trend and active of Super oxide anion is different. The scavenge ability of different solvent concentration extract with · OH is Ethanol extract＞20%Ethanol extract＞80%Ethanol extract＞60%Ethanol extract＞40%Ethanol extract. Conclusion: Either Super oxide anion or Hydroxyl radicals will be scavenged very well by any concentration ethanol extract. Compared with various concentrations, 20%Ethanol extract is better on scavenging Super oxide anion and Ethanol extract is better on scavenging Hydroxyl radical.
Key words: Hawk-tea-Sandy-tea; super oxide anion; hydroxyl radicals; scavenging effects
中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1001-8123(2010)04-0060-05
收稿日期：2010-03-31
2010年第4期总第134期
肉类研究
虫茶，是我国湘黔川渝山区特有的林业资源昆虫产品，为一些鳞翅目类昆虫的幼虫啃食腐熟树叶后的排泄物，同时也是我国的一种传统中药，在我国民间有着传统饮用的习惯[1]。早在明代李时珍的《本草纲目》中有记载：“此装茶笼内蛀虫也，取其屎用，蛀屑（主治）聍耳出汁，日日缴净，掺之……”[2]。据近年来的研究发现[3-6]，虫茶的营养价值高于普通茶，虫茶具有氨基酸含量高、种类丰富、比例合理的特点，富含对人体有益的矿物质及微量元素。由于虫茶具有丰富的营养成分，使虫茶更被赋予了比普通茶叶更多的保健功能，适量泡饮虫茶，能提神醒脑、解热驱毒、收敛止血、降压去脂、健脾和胃等，对治疗消化不良、鼻衄、痔疮出血、牙龈出血和疖肿有确切疗效，对预防高血压、高血脂和冠心病也有一定作用。
自由基(Free Radical)又称游离基，指外层轨道含有未配对的电子、原子团或特殊状态的分子。由于带有不成对电子具有配对的趋向，极易发生得电子或失电子的反应，化学性质活泼，存在时间仅10～10s，一旦生成又立即引发其他物质生成自由基，由此引发连锁反应[8]。在生物体内多种物质均可产生自由基，但研究最多、作用范围最广泛的就是氧自由基，它们无论是在机体的正常代谢还是病理变化中都极为重要。主要包括：超氧阴离子(O2•－)，羟基自由基(·OH)，单线态氧(O2)和过氧化氢(H2O2)具有类似氧自由基的性质和作用，通称活性氧或氧自由基(reactive oxygen species，ROS)。
自由基作为致病因子几乎和人类常见的几种主要疾病都有着密切的关系，近20年来活性氧和自由基的研究成为现代生命科学的前沿和热点，但现在还未见对虫茶抗氧化方面的研究，而抗氧化是开发利用虫茶的一个重要方面。故本实验针对老鹰茶虫茶醇提物对超氧阴离子和羟基自由基的清除能力方面做出研究。
1
-6
-8[7]
盐酸 AR 成都科龙化工试剂厂硫酸亚铁 AR 北碚化学试剂厂 无水乙醇 AR 成都科龙化工试剂厂30%过氧化氢 AR 重庆川东化工（集团）有限公司
邻二氮菲 AR 重庆北碚化学试剂厂3.1.2 实验仪器
仪器与设备名称 型号 产地或生产厂家电热恒温鼓风干燥箱 101-3-S 上海跃进医疗器械厂
数显恒温水浴锅 HH-2 金坛富华仪器有限公司
高速粉碎机 GWJ 江省上虞市沙筛厂精密pH仪 PHS-3B 上海精科雷磁仪器厂紫外可见分光光度计 752 上海精密仪器厂旋转蒸发仪 RE-86 上海本波仪器有限公司电子天秤 JA2004 上海精密科学仪器厂
3.2 实验方法
3.2.1 老鹰茶虫茶的粗提取
老鹰茶虫茶（过40目筛）20g以1∶10的料液比分别加不同浓度乙醇50℃回流三次，回流时间分别为1h，40min，30min，合并三次所得的浸液，过滤，于50℃减压浓缩，得醇制浸膏。
3.2.2 邻苯三酚法测定超氧阴离子自由基体系[9-10]3.2.2.1 测定的步骤
取4.5mL pH8的0.05mol/L磷酸盐缓冲液置于25℃水浴中加热20min，分别加入1ml试样和0.4ml 25mmol/l邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应5min，加入80mmol/l HCl 1ml终止反应，并摇匀，反应3min，在波长420nm处测定。3.2.2.2 计算公式
3 材料与方法3.1 实验材料
3.1.1 实验材料及处理
四川宜宾县的老鹰茶虫茶，采用鼓风机常温下鼓风干燥，高速粉碎机粉碎，过40目筛，入棕色干燥玻璃器皿中储存，待用时取出。3.1.2 实验试剂
实际名称 规格 产地或生产厂家磷酸二氢钠 AR 重庆北碚化学试剂厂磷酸氢二钠 AR 重庆北碚化学试剂厂邻苯三酚 AR 贵州遵义佳宏化工有限公司
HCl
A1：4.5ml pH8的0.05mol/l磷酸盐缓冲液+1ml试样+0.4ml 25mmol/l邻苯三酚溶液+1ml 80mmol/l
A2: 4.5ml pH8的0.05mol/l磷酸盐缓冲液+1ml试样+1ml 80mmol/l HCl
A3: 4.5ml pH8的0.05mol/l磷酸盐缓冲液+1ml无水乙醇+0.4ml 25mmol/l邻苯三酚溶液+1ml 80mmol/l HCl
注：A3中用无水乙醇代替醇提物，其他需要用乙醇替代的地方其替代的乙醇浓度与醇制浸膏的乙醇浓度相等
2010年第4期总第134期
专 题 综 述
3.2.3 邻二氮菲法测定羟基自由基体系[11-13]3.2.3.1 测定的步骤
参考文献并略作改进，利用Fenton法反应产生
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2010.4
虫茶醇提取物对超氧阴离子和
羟基自由基的清除作用
敖 纯
（西南大学 食品科学学院，重庆 400716）
摘 要：目的：本文对老鹰茶虫茶醇提取物对超氧阴离子和羟基自由基的清除作用进行了研究。方法：以老鹰茶虫茶为原料，以不同浓度的乙醇溶液粗提物，其醇制浸膏采用邻苯三酚法测定O2—、邻二氮菲法测OH体系。结果：老鹰茶虫茶40%乙醇提取物得率为最高。超氧阴离子的清除趋势、活性不一。清除OH的能力依次为：无水乙醇提取物＞20%乙醇提取物＞80%乙醇提取物＞60%乙醇提取物＞40%乙醇提取物。结论：无论是何种浓度乙醇提取物都表现出了良好的清除超氧阴离子和羟基自由基的能力。各种浓度相比之下，20%乙醇提取物对超氧阴离子清除能力较好，无水乙醇提取物对羟基自由基的清除能力较好。
关键词：老鹰茶虫茶；超氧阴离子；羟基自由基；清除作用
Scavenging Effects of Sandy-tea Ethanol Extract on Super
Oxide Anion and Hydroxyl Radical
AO Chun
(College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, China)
Abstract: Objective: This paper studies on the scavenging effects of Hawk-tea-Sandy-tea ethanol extract on Super oxide Anion and Hydroxyl Radical. Methods: For the materials with Hawk-tea-Sandy-tea, then using pyrogallol method to measure super oxide anion radical (O2•－), orthophenanthroline reaction method to measure hydroxyl radical(·OH)by the different solvent concentration extracts. Results: The rate of 40%Ethanol extract is the highest. The clear trend and active of Super oxide anion is different. The scavenge ability of different solvent concentration extract with · OH is Ethanol extract＞20%Ethanol extract＞80%Ethanol extract＞60%Ethanol extract＞40%Ethanol extract. Conclusion: Either Super oxide anion or Hydroxyl radicals will be scavenged very well by any concentration ethanol extract. Compared with various concentrations, 20%Ethanol extract is better on scavenging Super oxide anion and Ethanol extract is better on scavenging Hydroxyl radical.
Key words: Hawk-tea-Sandy-tea; super oxide anion; hydroxyl radicals; scavenging effects
中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1001-8123(2010)04-0060-05
收稿日期：2010-03-31
2010年第4期总第134期
肉类研究
虫茶，是我国湘黔川渝山区特有的林业资源昆虫产品，为一些鳞翅目类昆虫的幼虫啃食腐熟树叶后的排泄物，同时也是我国的一种传统中药，在我国民间有着传统饮用的习惯[1]。早在明代李时珍的《本草纲目》中有记载：“此装茶笼内蛀虫也，取其屎用，蛀屑（主治）聍耳出汁，日日缴净，掺之……”[2]。据近年来的研究发现[3-6]，虫茶的营养价值高于普通茶，虫茶具有氨基酸含量高、种类丰富、比例合理的特点，富含对人体有益的矿物质及微量元素。由于虫茶具有丰富的营养成分，使虫茶更被赋予了比普通茶叶更多的保健功能，适量泡饮虫茶，能提神醒脑、解热驱毒、收敛止血、降压去脂、健脾和胃等，对治疗消化不良、鼻衄、痔疮出血、牙龈出血和疖肿有确切疗效，对预防高血压、高血脂和冠心病也有一定作用。
自由基(Free Radical)又称游离基，指外层轨道含有未配对的电子、原子团或特殊状态的分子。由于带有不成对电子具有配对的趋向，极易发生得电子或失电子的反应，化学性质活泼，存在时间仅10～10s，一旦生成又立即引发其他物质生成自由基，由此引发连锁反应[8]。在生物体内多种物质均可产生自由基，但研究最多、作用范围最广泛的就是氧自由基，它们无论是在机体的正常代谢还是病理变化中都极为重要。主要包括：超氧阴离子(O2•－)，羟基自由基(·OH)，单线态氧(O2)和过氧化氢(H2O2)具有类似氧自由基的性质和作用，通称活性氧或氧自由基(reactive oxygen species，ROS)。
自由基作为致病因子几乎和人类常见的几种主要疾病都有着密切的关系，近20年来活性氧和自由基的研究成为现代生命科学的前沿和热点，但现在还未见对虫茶抗氧化方面的研究，而抗氧化是开发利用虫茶的一个重要方面。故本实验针对老鹰茶虫茶醇提物对超氧阴离子和羟基自由基的清除能力方面做出研究。
1
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-8[7]
盐酸 AR 成都科龙化工试剂厂硫酸亚铁 AR 北碚化学试剂厂 无水乙醇 AR 成都科龙化工试剂厂30%过氧化氢 AR 重庆川东化工（集团）有限公司
邻二氮菲 AR 重庆北碚化学试剂厂3.1.2 实验仪器
仪器与设备名称 型号 产地或生产厂家电热恒温鼓风干燥箱 101-3-S 上海跃进医疗器械厂
数显恒温水浴锅 HH-2 金坛富华仪器有限公司
高速粉碎机 GWJ 江省上虞市沙筛厂精密pH仪 PHS-3B 上海精科雷磁仪器厂紫外可见分光光度计 752 上海精密仪器厂旋转蒸发仪 RE-86 上海本波仪器有限公司电子天秤 JA2004 上海精密科学仪器厂
3.2 实验方法
3.2.1 老鹰茶虫茶的粗提取
老鹰茶虫茶（过40目筛）20g以1∶10的料液比分别加不同浓度乙醇50℃回流三次，回流时间分别为1h，40min，30min，合并三次所得的浸液，过滤，于50℃减压浓缩，得醇制浸膏。
3.2.2 邻苯三酚法测定超氧阴离子自由基体系[9-10]3.2.2.1 测定的步骤
取4.5mL pH8的0.05mol/L磷酸盐缓冲液置于25℃水浴中加热20min，分别加入1ml试样和0.4ml 25mmol/l邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应5min，加入80mmol/l HCl 1ml终止反应，并摇匀，反应3min，在波长420nm处测定。3.2.2.2 计算公式
3 材料与方法3.1 实验材料
3.1.1 实验材料及处理
四川宜宾县的老鹰茶虫茶，采用鼓风机常温下鼓风干燥，高速粉碎机粉碎，过40目筛，入棕色干燥玻璃器皿中储存，待用时取出。3.1.2 实验试剂
实际名称 规格 产地或生产厂家磷酸二氢钠 AR 重庆北碚化学试剂厂磷酸氢二钠 AR 重庆北碚化学试剂厂邻苯三酚 AR 贵州遵义佳宏化工有限公司
HCl
A1：4.5ml pH8的0.05mol/l磷酸盐缓冲液+1ml试样+0.4ml 25mmol/l邻苯三酚溶液+1ml 80mmol/l
A2: 4.5ml pH8的0.05mol/l磷酸盐缓冲液+1ml试样+1ml 80mmol/l HCl
A3: 4.5ml pH8的0.05mol/l磷酸盐缓冲液+1ml无水乙醇+0.4ml 25mmol/l邻苯三酚溶液+1ml 80mmol/l HCl
注：A3中用无水乙醇代替醇提物，其他需要用乙醇替代的地方其替代的乙醇浓度与醇制浸膏的乙醇浓度相等
2010年第4期总第134期
专 题 综 述
3.2.3 邻二氮菲法测定羟基自由基体系[11-13]3.2.3.1 测定的步骤
参考文献并略作改进，利用Fenton法反应产生