胃蛋白酶（Pepsin）试剂盒使用说明
分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2320
规格：50/24S
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入25mL 试剂二充分溶解。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入25mL 蒸馏水充分溶解。
试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入30mL 蒸馏水充分溶解。
试剂六：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1支，0.5μmol/mL酪氨酸标准溶液浓度4℃保存。
产品说明：
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。
自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。
二、测定步骤：
1.
2.
3. 分光光度计预热30min，调节波长到580nm，蒸馏水调零。试剂三和试剂四置于37℃水浴预热30min。标准管：取EP 管，加入100μL标准品，200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 标准管。
4. 空白管：取EP 管，加入100μL蒸馏水，200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 空白管。
5. 对照管：取EP 管，加入500μL试剂三，置于37℃水浴保温10min；加入500μL试剂四，盖紧后摇匀1min；加入100μL粗酶液，混匀后8000g 4℃离心10分钟；取上清液100μL，加入新EP 管，再加入200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 对照管。
6. 测定管：取EP 管，加入100μL粗酶液，500μL试剂三，置于37℃水浴保温10min；加入500μL试剂四，盖紧后摇匀1min；8000g4℃离心10分钟；取上清液100μL，加入新EP 管，再加入200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 测定管。
注意：空白管和标准管只需要测定一次。
三、计算公式：
1) 按照蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1nmol 酪氨酸为1个酶活单位。
胃蛋白酶活性（nmol/min/mgprot）=C标准品×（A测定管－A对照管）÷（A标准管
－A空白管）×稀释倍数÷（Cpr×V1）÷T=5500×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）÷Cpr
C 标准品：标准品浓度，0.5μmol/mL酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL=0.1mL；T：催化反应时间（min），10min。
2) 按照样本质量计算
活性单位定义：37℃每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成1nmol 酪氨酸为1个酶活单位。
胃蛋白酶活性（nmol/min/g）=C标准品×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）×稀释倍数÷（W×V1÷V2）÷T=5500×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）÷W
C 标准品：标准品浓度，0.5μmol/mL酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；W：组织质量（g）；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL=0.1mL；V2：粗酶液总体积（mL），1mL；T：催化反应时间（min），10min。
注意事项：
试剂三、试剂四、试剂五临用前配制，配制好用不完的试剂4℃可保存一周。
胃蛋白酶（Pepsin）试剂盒使用说明
分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2320
规格：50/24S
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入25mL 试剂二充分溶解。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入25mL 蒸馏水充分溶解。
试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入30mL 蒸馏水充分溶解。
试剂六：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1支，0.5μmol/mL酪氨酸标准溶液浓度4℃保存。
产品说明：
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。
自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。
二、测定步骤：
1.
2.
3. 分光光度计预热30min，调节波长到580nm，蒸馏水调零。试剂三和试剂四置于37℃水浴预热30min。标准管：取EP 管，加入100μL标准品，200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 标准管。
4. 空白管：取EP 管，加入100μL蒸馏水，200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 空白管。
5. 对照管：取EP 管，加入500μL试剂三，置于37℃水浴保温10min；加入500μL试剂四，盖紧后摇匀1min；加入100μL粗酶液，混匀后8000g 4℃离心10分钟；取上清液100μL，加入新EP 管，再加入200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 对照管。
6. 测定管：取EP 管，加入100μL粗酶液，500μL试剂三，置于37℃水浴保温10min；加入500μL试剂四，盖紧后摇匀1min；8000g4℃离心10分钟；取上清液100μL，加入新EP 管，再加入200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm 测光吸收，记为A 测定管。
注意：空白管和标准管只需要测定一次。
三、计算公式：
1) 按照蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1nmol 酪氨酸为1个酶活单位。
胃蛋白酶活性（nmol/min/mgprot）=C标准品×（A测定管－A对照管）÷（A标准管
－A空白管）×稀释倍数÷（Cpr×V1）÷T=5500×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）÷Cpr
C 标准品：标准品浓度，0.5μmol/mL酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL=0.1mL；T：催化反应时间（min），10min。
2) 按照样本质量计算
活性单位定义：37℃每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成1nmol 酪氨酸为1个酶活单位。
胃蛋白酶活性（nmol/min/g）=C标准品×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）×稀释倍数÷（W×V1÷V2）÷T=5500×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）÷W
C 标准品：标准品浓度，0.5μmol/mL酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；W：组织质量（g）；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL=0.1mL；V2：粗酶液总体积（mL），1mL；T：催化反应时间（min），10min。
注意事项：
试剂三、试剂四、试剂五临用前配制，配制好用不完的试剂4℃可保存一周。