实验一 薄层层析法测定果酱中苯甲酸、山梨酸的含量
一、原理
先将样品酸化，然后用乙醚提取苯甲酸和山梨酸。再将提取液浓缩，点样于聚酰胺板上，经展开、显色后，并与标准点比较可进行概略定量。
二、试剂
6 mol/L HCl (1:1) 乙醚：除去过氧化物
4% NaCl 酸性溶液 无水乙醇
无水硫酸钠 硅胶G
展开剂： 石油醚：丙酮(10:1)
显色剂：0.04%溴甲酚紫（用50%的乙醇配制，并用0.1 mol/L NaOH 调至pH=8） 苯甲酸标准液（2mg/mL）：精密称取0.2000g 苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100mL 容量瓶中定容。
山梨酸标准液（2mg/mL）：精密称取0.2000g 山梨酸，用少量乙醇溶解后移入100mL 容量瓶中定容。
三、仪器
玻璃板（10×10cm ）微量注射器（10uL 、20uL ）、层析缸、喷雾器、吹风机
四、测定操作
1、样品处理
称取25g 混合均匀的样品，置于100mL 分液漏斗中加0.5mL HCl酸化，用15、10mL 乙醚提取两次，每次振摇1min ，静置分层后将醚层分出，合并乙醚提取液。用3mL 4%NaCl酸性溶液洗涤两次，弃去水层，静置15min ，再分离出水层，将乙醚提取液通过无水硫酸钠移入25mL 容量瓶中，加乙醚定容。吸取10.00mL 乙醚提取液分两次置于10mL 具塞离心管中，在约40℃水浴上挥干，加入0.1mL 乙醇溶解残渣，备用。
2、硅胶薄层板的制备
称取10g 硅胶G ，加0.5%CMC-Na溶液30mL ，研磨3min ，在10×10cm 玻璃板上使其均匀即涂成0.25-0.30mm 厚的薄层，室温下干燥1h ，置于烘箱内110℃干燥1h ，取出后置干燥器中备用。
3、点样
在距薄层板下端1cm 的基线上，用微量注射器点1uL 、2uL 样品液，同时分别点1uL 、2uL 苯甲酸、山梨酸标准溶液，点间距1.5cm 。
4、展开显色
将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂的展开槽中，展开槽内壁贴有滤纸，待溶剂前沿上展至10cm ，取出挥干，喷显色剂，斑点黄色，背景蓝色。
5、定性与定量
把样品斑点与标准斑点比较，若与标准斑点同一位置线上出现样品斑点，说明样液中存在苯甲酸或山梨酸。然后根据斑点的面积大小及颜色深浅确定样品点的苯甲酸、山梨酸的含量，再进行计算。
五、计算
样品中苯甲酸的含量（g/kg） = A ⨯1000 (山梨酸) m ⨯25⨯V 21⨯1000
A ——点样用样液中苯甲酸（山梨酸）的含量mg
M ——称取的样品质量g
V 1——溶解残渣时加乙醇体积mL
V 2——点样的体积mL
实验一 薄层层析法测定果酱中苯甲酸、山梨酸的含量
一、原理
先将样品酸化，然后用乙醚提取苯甲酸和山梨酸。再将提取液浓缩，点样于聚酰胺板上，经展开、显色后，并与标准点比较可进行概略定量。
二、试剂
6 mol/L HCl (1:1) 乙醚：除去过氧化物
4% NaCl 酸性溶液 无水乙醇
无水硫酸钠 硅胶G
展开剂： 石油醚：丙酮(10:1)
显色剂：0.04%溴甲酚紫（用50%的乙醇配制，并用0.1 mol/L NaOH 调至pH=8） 苯甲酸标准液（2mg/mL）：精密称取0.2000g 苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100mL 容量瓶中定容。
山梨酸标准液（2mg/mL）：精密称取0.2000g 山梨酸，用少量乙醇溶解后移入100mL 容量瓶中定容。
三、仪器
玻璃板（10×10cm ）微量注射器（10uL 、20uL ）、层析缸、喷雾器、吹风机
四、测定操作
1、样品处理
称取25g 混合均匀的样品，置于100mL 分液漏斗中加0.5mL HCl酸化，用15、10mL 乙醚提取两次，每次振摇1min ，静置分层后将醚层分出，合并乙醚提取液。用3mL 4%NaCl酸性溶液洗涤两次，弃去水层，静置15min ，再分离出水层，将乙醚提取液通过无水硫酸钠移入25mL 容量瓶中，加乙醚定容。吸取10.00mL 乙醚提取液分两次置于10mL 具塞离心管中，在约40℃水浴上挥干，加入0.1mL 乙醇溶解残渣，备用。
2、硅胶薄层板的制备
称取10g 硅胶G ，加0.5%CMC-Na溶液30mL ，研磨3min ，在10×10cm 玻璃板上使其均匀即涂成0.25-0.30mm 厚的薄层，室温下干燥1h ，置于烘箱内110℃干燥1h ，取出后置干燥器中备用。
3、点样
在距薄层板下端1cm 的基线上，用微量注射器点1uL 、2uL 样品液，同时分别点1uL 、2uL 苯甲酸、山梨酸标准溶液，点间距1.5cm 。
4、展开显色
将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂的展开槽中，展开槽内壁贴有滤纸，待溶剂前沿上展至10cm ，取出挥干，喷显色剂，斑点黄色，背景蓝色。
5、定性与定量
把样品斑点与标准斑点比较，若与标准斑点同一位置线上出现样品斑点，说明样液中存在苯甲酸或山梨酸。然后根据斑点的面积大小及颜色深浅确定样品点的苯甲酸、山梨酸的含量，再进行计算。
五、计算
样品中苯甲酸的含量（g/kg） = A ⨯1000 (山梨酸) m ⨯25⨯V 21⨯1000
A ——点样用样液中苯甲酸（山梨酸）的含量mg
M ——称取的样品质量g
V 1——溶解残渣时加乙醇体积mL
V 2——点样的体积mL